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今天，你核酸了吗？
对于核酸提取的知识你又了解多少？今天小编就给大家分享一些在核酸提取的知识。
一、什么是核酸
核酸是储存、复制和传递遗传信息的主要物质，主要有DNA和RNA，而核酸提取是分子生物学应用中最基本的步骤之一，是许多实验的先决条件。提取的核酸质量将直接影响后续实验检测的结果。
二、核酸提取的基本步骤
1、裂解细胞，释放核酸。使用裂解液破坏样品细胞结构，从而使样品中的DNA游离在裂解体系中；
2、核酸的分离与纯化。需要将与核酸结合的蛋白质以及多糖、脂类等生物大分子和其他不需要的核酸分子去除；
3、核酸的浓缩、沉淀
4、纯化核酸。纯化则是使DNA与裂解体系中的其它成分，如蛋白质、盐及其它杂质彻底分离的过程。
图 核酸分离纯化示意图
三、核酸提取的基本步骤
酚氯仿抽法 | 异硫氰酸胍/苯酚法 | 离心柱法 | 磁珠法 | |
纯度 | 较高 | 低 | 高 | 高 |
稳定性 | 低 | 低 | 高 | 高 |
技术要求 | 高 | 高 | 低 | 低 |
操作时间 | 较长 | 长 | 短 | 短 |
表1 几种核酸提取纯化方法比较
1、酚氯仿抽法
此法是DNA提取的经典方法，主要是使用两种不同的有机溶剂交替抽提将蛋白去除。用苯酚处理匀浆液时，由于蛋白与DNA的联结键已断，蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶，同时苯酚抑制了DNase的降解作用，蛋白质分子溶于酚相，而DNA溶于水相。离心分层后取出水层，多次重复操作，再合并含DNA 的水相，利用核酸不溶于醇的性质，用乙醇沉淀DNA。离心后，DNA可取出。
2、异硫氰酸胍/苯酚法（Trizol法）
Trizol法是提取RNA的经典方法，在匀质化或溶解样品中，Trizol试剂可保持RNA的完整性，同时又能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后，裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。水相转移后，RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后，用乙醇可从中间相沉淀得到DNA，加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。
3、 离心柱法
通过特殊硅基质吸附材料，能够特定吸附DNA，而RNA和蛋白质顺利通过，然后利用高盐低PH结合核酸，低盐高PH值洗脱，来分离纯化核酸。离心柱纯化也是试剂盒提取中广泛的使用方法。
4、 磁珠法提取
磁珠法不需要离心、无需加入多种试剂，操作简单，符合核酸自动化提取要求。但是成本较高，科研端使用很难普及。
四、核酸检测过程中用到哪些耗材
滤芯吸头、离心管、PCR管、PCR8连排、PCR板、深孔板、封板膜、试剂槽、离心管架等
1. 滤芯吸头
建诺为吸头由进口聚丙烯材质制成，滤芯由超高分子量聚乙烯制成。10μl、10μl加长、20μl、200μl、200μl加长、300μl、1000μl、1000μl加长等多种规格可供选择。96支/盒，灭菌处理，无酶无热原。
2. 微量离心管
建诺为离心管采用进口聚丙烯材质制成，0.6ml、1.5ml、2ml、5ml、10ml五种规格可选。
0.6/1.5/2/5ml可承受13000G离心力,10ml可承受6000G离心力，管体高透明，便于样本观察。袋装，无酶无热原，可提供灭菌和低吸附规格。
3.1、建诺为PCR八联管（0.1ml,0.2ml）
无酶无热原，颜色（白色/透明），平盖，还有连盖款。
3.2、建诺为PCR 96孔板（0.1ml,0.2ml）
无酶无热原，颜色（白色/透明），裙边（无裙边/半裙边），带裙边的PCR板适合在自动化应用中进行处理，裙边为自动化的机械抓手提供了支撑面积。
3.3、建诺为384孔板（0.1ml）
无酶无热原，颜色（白色/透明），板上有字母和数字标记，方便标示。
3.4、建诺为PCR封板膜
压敏膜，对皮肤和手套无粘性，适用于荧光定量PCR检测。
04. 试剂槽
建诺为试剂槽50ml规格。聚苯乙烯（PS）材质，无菌独立包装。单渠 V 型底设计，适合在细胞培养和免疫分析等实验中与单通道和多通道移液器配合使用，三角引流设计，倾倒更安全。
