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产品介绍 | 治愈你的PCR耗材选择困难症

2023/09/22


PCR(polymerase chain reaction) :聚合酶链式反应,又称体外DNA扩增技术。在模板DNA,4种游离脱氧核糖核苷酸存在情况下利用DNA聚合酶的功能,将待扩增DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物进行“变性——退火——延伸” 多次循环,从而在短时间内获得大量所需目的基因片段。


师妹:DNA扩增条带跑不出,很多非特异性条带真的辣眼睛,片状拖带二度崩溃......

师兄影响PCR实验结果的原因有很多,下面这些需要注意:

1. 模板DNA降解,浓度过低了?

2. 引物设计不当降解了?特异性差?

3. 酶的质量有问题,加酶量过多?

4. PCR循环次数过多?

5. PCR仪循环次数过多?温度不当?

6.  Mg2+浓度过高或过低?

7. dNTP浓度过高或过低?


小为工欲善其事,必先利其器,别看分子实验操作相对简单,影响因素却很多,PCR耗材是一个非常重要,也极易被忽视的因素之一。

GENEVER

治愈你的PCR耗材选择困难症 

1

材质

PCR耗材通常由聚丙烯(Polypropylene,PP)制成,聚丙烯具有化学惰性,可最大限度的降低反应物质的吸收确保实验得到最佳的PCR结果,且聚丙烯制成的耗材能够承受PCR反应热循环过程中的温度不断快速变化。另外自动化实验室还需要用到双材质(PP+PC)PCR耗材,某些qPCR板还会使用更强的聚碳酸酯制做边框,从而提高PCR板边框的机械稳定性。

2

不同颜色的PCR板我应该怎么选呢?

PCR板通常可以提供多种颜色,一方面提供更好的辨识度,以便于对于样品的视觉区分、页面观察等,特使是在高通量实验中。另一方面提供更准确的检测结果,通常以透明和白色为主,对于DNA扩增,塑料颜色对DNA扩增没有影响,我们可推荐的产品种类较多,但在qPCR反应中,与透明耗材相比,我们更推荐使用白色或磨砂透明的耗材,以实现灵敏和准确的荧光检测。


白色耗材可通过阻止荧光折射出反应管来提高qPCR数据的灵敏度和一致性,折射被最小化时,更多的信号被反射回检测器,从而增加信噪比。此外,白色或磨砂管壁可阻止荧光信号传递至PCR仪加热模块,避免被吸收或不一致的反射荧光信号。

3

不同体积的PCR管/板,我该怎么选呢?平盖 or凸盖?

常见反应管规格及体积:

单管:0.2mL,0.1mL,0.5mL,灵活选择样品数

八联排管:0.2mL,0.1mL

96孔板:0.2mL,0.1mL(高通量)

对于八联排管或者96孔板,一般会区分高容量和低容量,即0.2mL和0.1mL,0.1mL也叫快速反应管或板。不同厂家有不用的叫法,以Bio-Rad为例,他们习惯性将0.1mL叫做Low-profile,0.2mL叫做High-profile,而国内则一般就叫0.1mL、0.2mL板或者管。

选择平盖还是凸盖?

平盖:qPCR的不二之选,为qPCR提供精确荧光传递,书写标记。

凸盖:更适合常规PCR,可与热盖接触,减少变形,但是影响荧光传递,不适合qPCR使用。

4

如何选择裙边?

PCR“裙边”是为96孔板,384孔板设计的,可为反应体系构建时的移液过程提供较好稳定性,以及在自动化机械处理时提供更好的机械强度。包括无裙边,半裙边,全裙边。

无裙边板:周围缺少面板,可适用于大多数的PCR仪或qPCR仪,不适用于自动化应用。移液过程中稳定性不高,需要配合板托使用。

 半裙边板:板周围具有短的边缘,可提供足够支撑,且适配标签或应用条码,可用于自动化应用,较全裙板装液量大。

 全裙边板:具有覆盖板高度的边缘面板,非常适用于自动化实验应用,也可适配标签及应用条码。机械强度较好,可适用于凸出模块的PCR仪,且移液过程中稳定性高。

Tab.不同类型裙边性能对比

5

切角

切角是PCR板的一个角缺失者两个角缺失,取决于所需适配的机器。切角位置可位于,切角可能位于96孔板的A1、A12、H1或H12位置,或384孔板的A24或P24位置,一般的普通PCR仪对于切角没有要求。

6

PCR封板膜有很多类型,怎么选择呢?

PCR实验要求选用适配的高质量封板膜,不仅能有效地保护样品,防止污染,还可以提供可信赖的实验检测数据。

qPCR高透膜:由高透光的塑料薄膜制成,一般有粘性膜和压感膜两种,每一种均可提供优良的透光率,确保实验的准确性。

PCR膜:条膜密封8联管,减少管盖密封变形造成的漏液风险,经济方便;板膜适合PCR,以及ELISA,ELA等显色分析实验,透光,适合光学和肉眼观察。

PCR储存膜:适合PCR,ELISA或者样品储存,可重复使用。也可-80度样品保藏透明,可用于显色分析或肉眼观察。

GENEVER

Genever PCR Tubes&Plates高品质PCR耗材系列

PCR耗材

透明高分子聚丙烯制成,孔壁薄,厚度均匀,具有极好的热传导效应,结果可靠,重复性强。

密封性好,可有效减少样品蒸发。

尺寸符合ANSI SBS标准,可用于自动化应用。

黑色字母标识,手动加样时可快速识别样本并溯源。

十万级洁净环境生产,专属质量实验室验证测试,确保产品洁净度。

每个孔都进行100%密封性能测试,确保样本处理安全性。

无热原,无内毒素,无DNA/RNA酶。

目前产品有单管(平盖),八联管(A款&B款),八联排管,96孔板,384孔板5种规格,其中96孔板提供无裙边、半裙边,全裙边,容量有0.1ml和0.2ml,颜色分为透明和白色两种。

订购信息 



1

建诺为 PCR单管(平盖)

2

建诺为 PCR八联管

3

建诺为 PCR连盖八联排管

4

建诺为 PCR 96孔 PCR板

5

建诺为 384孔板

6

建诺为 PCR管架96孔

7

建诺为 PCR封板膜


建诺为生物技术(江苏)有限公司

电话:4009968872

网址:www.genever-bio.com

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